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ARS, Cepheid team to make plant disease diagnosis faster, easier and more accurate
Un grupo podrá hacer más fácil la diagnosis de las enfermedades de planta

ARS News Service
Agricultural Research Service, USDA
Jan Suszkiw, (301) 504-1630, jsuszkiw@ars.usda.gov
November 29, 2001

When it comes to fighting crop diseases, field surveillance also has its place on the front lines of farming. That's why Agricultural Research Service scientists and Cepheid, a Sunnyvale, Calif., company, are collaborating on tests of portable, DNA-based devices that will identify plant disease organisms in less than 60 minutes versus days or weeks by traditional methods.

Rather than await results from diagnostic labs using such methods, for example, Extension Service agents could make on- site, "real-time" recommendations on how best to curtail a crop disease outbreak before it spreads further. Another foreseeable use is checking perishable plant
materials at ports of entry for exotic plant disease organisms that could imperil domestic crops, notes Norm Schaad, with ARS' Exotic Diseases-Weed Science Research Unit, Frederick, Md. (www.armymedicine.army.mil/usda)

Along with ARS lab associates Reid Frederick and Vern Damsteegt, Schaad is collaborating with Cepheid under a cooperative research and development agreement (CRADA) with ARS. Cepheid's portable Smart Cycler unit, which connects to a laptop computer, uses polymerase chain reaction (PCR) to replicate a target pathogen's DNA--its unique genetic fingerprint.

The ARS scientists are using their expertise in bacterial, fungal, and viral genetics to design primers and probes targeting specific DNA sequences of several major plant pathogens. The primer's main job is to bind with a pathogen's DNA--if present in a leaf sample, for example--and prepare it for PCR amplification on the testing unit. The amplified DNA also binds with the probe, emitting a flourescent signal at the end of each PCR amplification cycle that's measured and displayed on the computer.

For bacteria, users need only immerse infected tissue specimens in water for 20 minutes before placing a microliter sample of it into one of the unit's 16 reaction chambers--no DNA extraction is necessary.

The ARS scientists will share data from lab and field tests of the Smart Cycler using ARS primer/probes for Pierce's disease, citrus canker, watermelon fruit blotch, bacterial wilt, brown rot of potato, potato ring rot, Karnal bunt, soybean rust, plum pox and other diseases. Under the
CRADA, Cepheid has first rights to commercialization of primers and probes for these diseases.

ARS is the U.S. Department of Agriculture's main scientific research agency.


Un grupo podrá hacer más fácil la diagnosis de las enfermedades de planta

Servicio Noticiero del Servicio de Investigación Agrícola (ARS siglas en inglés)
Departamento de Agricultura (USDA siglas en ingles)
Jan Suszkiw, (301) 504-1630, jsuszkiw@ars.usda.gov
29 de noviembre 2001

Cuando se trata de combatir las enfermedades de cosecha, la vigilancia del campo también es crítica. Por eso es que los científicos del Servicio de Investigación Agrícola (ARS) y Cepheid, una compañía en Sunnyvale, California, están colaborando para desarrollar ensayos portátiles. Esto
ensayos son basados en dispositivos que usan la DNA para identificar los organismos de las enfermedades de planta en menos de 60 minutos en vez de días o semanas.

En vez de esperar por los resultados de los laboratorios diagnósticos que utilizan métodos tradicionales, por ejemplo, los agentes del Servicio de Extensión pueden hacer recomendaciones inmediatas en como combatir mejor la enfermedad de cosecha antes de que se esparce más. Otra utilización posible es la investigación de los materiales de planta de fácil deterioro en los puertos de entrada para encontrar los organismos exóticos de las enfermedades de planta cuales pueden hacer daño a las cosechas domesticas, según Norm Schaad, con la Unidad de Investigación de la Ciencia de Enfermedades Exóticas y de Malas Hierbas en Frederick, Maryland.

Junto con Reid Frederick y Vern Damsteegt de ARS, Schaad está colaborando con Cepheid bajo un CRADA (acuerdo cooperativo de investigación y desarrollo) con ARS. El equipo de Cepheid llamado Smart Cycler se conecta a una computadora portátil y utiliza una técnica científica llamada polymerase chain reactionpara replicar la DNA del patógeno--su identidad genética única.

Los científicos de ARS están utilizando sus conocimientos en la genética bacteriana, fungal y viral para diseñar cebadores y sondas que encuentran las secuencias específicas de la DNA en varios patógenos mayores de planta. El trabajo principal del cebador es ligarse con la DNA del patógeno--si está presente en una muestra de hoja, por ejemplo--y prepararlo para la amplificación por PCR en el equipo ensayador. La DNA amplificada también se liga al cebador y emite una señal fluorescente al fin de cada ciclo durante la amplificación por PCR. Esta señal se mide y se muestra en la computadora.

Para la bacteria, los utilizadores necesitan sumergir los especímenes del tejido infectado en el agua por 20 minutos antes de poner la muestra de un micro liter en una de las 16 cámaras de reacción--no se necesita extraer la DNA.

Los científicos del ARS compartirán los datos de los ensayos del Smart Cycler utilizando los cebadores y sondas del ARS para identificar las enfermedades de planta Pierce's disease, citrus canker, watermelon fruit blotch, bacteria wilt, brown rot of potato, potato ring rot, kjarnal bunt,
soybean rust, plum pox y otras enfermedades. Bajo el CRADA, Cepheid tiene los primeros derechos para comercializar los cebadores y las sondas para estas enfermedades.

ARS es la agencia principal de investigaciones científicas del Departamento de Agricultura de Estados Unidos.

USDA news release
N3997

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